Инфекционный бронхит кур штаммы

ОРЗ

Инфекционный бронхит кур (bronchitis infectiosa) – высококонтагиозное заболевание молодняка и взрослых кур, сопровождающееся поражением дыхательных путей и репродуктивных органов.

Возбудитель болезни — РНК-содержащий, сложноорганизованный вирус относящийся к семейству Coronaviridae. Суперкапсида имеет ворсинки напоминающие «солнечную корону». Он обладает гемагглютинирующей активностью в отношении эритроцитов кур. Свою репродукцию он осуществляет в цитоплазме культуры клеток куриных фибробластов и РКЭ, у которых отмечают «эффект карликовости».

В птичнике вирус сохраняется до 50 дн., в помете 90 дн., при 56оС инактивация наступает за 10 минут.

Эпизоотология. В естественных условиях восприимчивы куры всех возрастных групп, но болеют цыплята до 30- дневного возраста. Человек переболевает с легкими признаками поражения верхних дыхательных путей.

Источником возбудителя инфекции является больная и переболевшая птица, которая остается вирусоносителем в течение 105-и — 365-и дней. Больная птица выделяет вирус с секретом дыхательных путей, со слюной, яйцом и пометом. Факторами передачи служат инфицированное инкубационное яйцо, воздух, корм, вода, предметы ухода. У петухов вирус передается со спермой в течение 20-ти дней после заражения, в связи с чем возможен половой путь заражения. Обычно заражение происходит аэрогенно, а также алиментарным путем и трансовариально.

Патогенез. Вирус при попадании на эпителиальные клетки трахеи, вызывает в них дистрофические процессы и десквамацию. При этом повышается проницаемость кровеносных сосудов, что приводит к отеку слизистой оболочки и клеточной инфильтрации. Кроме того, развиваются воспалительные процессы в репродуктивных органах и почках.

Симптомы и течение. Инкубационный период продолжается от нескольких часов до 2-6-ти дней. Болезнь протекает остро, хронически и бессимптомно. Отмечают три клинические формы болезни: респираторную, нефрозо-нефритную и репродуктивную.

Респираторная форма протекает остро и проявляется у молодняка и характеризуется кашлем, трахеальными хрипами, носовыми истечениями, затрудненным дыханием (с открытым клювом), иногда конъюнктивитом, ринитом и синуситом.

Нефрозо-нефритная форма также протекает остро (особенно у молодняка первых недель жизни). Проявляется поражением почек и мочеточников с отложением уратов. У больной птицы отмечается депрессия и диарея с примесью уратов в помете.

Репродуктивная форма регистрируется обычно у кур старше 6-месячного возраста. Заболевание протекает бессимптомно или с незначительными поражениями органов дыхания. Единственным признаком болезни в этих случаях является длительное снижение яйценоскости (на 30-80%).

Больные куры несут мелкие, неправильной формы яйца с тонкой скорлупой. В дальнейшем яйценоскость восстанавливается, но не достигает прежнего уровня.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии павшей птицы выявляют фибринозный бронхит и трахеит, катарально-фибринозную пневмонию и серозно-фибринозный аэросаккулит. У взрослой птицы обнаруживают атрофию яичников и наличие в яйцеводе казеозно-фибринозной массы.

Диагноз. Его считают установленным после выделения вируса с последующей его идентификацией. При постановке диагноза необходимо исключить ИЛТ, оспу, ньюкаслскую болезнь и респираторный микоплазмоз.

Лечение. Не проводится.

Профилактика и меры борьбы. С целью профилактики не допускается хозяйственная связь птицефабрик с неблагополучными по ИБК хозяйствами, для инкубации разрешается использовать яйцо только от клинически здоровой птицы, которое было подвергнуто четырехкратной дезинфекции.

При установлении диагноза птицефабрику объявляют неблагополучной и вводят ограничения, по условиям которых запрещается: вывоз инкубационных яиц и эмбрионов; вывоз живой птицы и продажа ее населению; перемещение птицы внутри фабрики и за ее пределами; комплектование племенных стад птицей, переболевшей ИБК; взятие спермы от петухов и искусственное осеменение кур.

Проводят клиническое исследование, больную, слабую и некондиционную птицу уничтожают бескровным методом и подвергают технической утилизации. Остальную птицу неблагополучного птичника отправляют для убоя. При возникновении болезни в нескольких цехах, больную и слабую птицу перерабатывают на мясо-костную муку. Клинически здоровое поголовье благополучных птичников и цехов подвергают иммунизации. В хозяйствах неблагополучных по ИБК, необходимо сразу вакцинировать птицу всех возрастных групп, а затем весь подрастающий молодняк. Поголовную вакцинацию птиц в хозяйстве следует проводить в течение 2-х лет, т.е. до полного оборота стада с использованием сухой вирусвакциной против инфекционного бронхита кур из штамма «АМ»; сухой живой вирусвакцины против инфекционного бронхита кур из штамма Н-120 и Н52 и ассоциированной инактивированной эмульсионной жидкой вакцины против инфекционного бронхита кур и синдрома снижения яйценоскости-76.

На бройлерных птицефабриках весь санитарный брак подвергают технической утилизации, остальную больную птицу направляют для промпереработки. Условно здоровую птицу по окончании технологического цикла направляют на убой без ограничений.

Хозяйство объявляют благополучным через 3 месяца после последнего случая выделения больной птицы. Перед снятием ограничений проводят тщательную заключительную дезинфекцию.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур. Целью изобретения является повышение реакто-генности, безвредности и иммуногенности штамма. Вакцинный штамм AM получен методом последовательных пассажей на развивающихся куриных эмбрионах и в культуре клеток из эпизоотического штамма депонирован во ВГНКИ под Ms 65. Штамм AM обладает слабой остаточной вирулентностью, не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1-30-ден8ного возраста при введении в дозе 10 -10^ ЭИД50/0,2 мл, в 50- 100 раз превышающей вакцинальную. При двукратном введении цыплятам 10-18- дневного возраста в разведении 1:25- 1:100 штамм AM создает прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур референтных штаммов серотипов Массачузетс, Коннектикут, Айова-97, Айова-609 и штаммов, выделенных в СССР.

РЕСПУБЛИК (st)s С 12 N 7/00

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

К АВТОРСКОМУ СВЛДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4847703/13 (22) 30.05.90 (46) 30.01.92. Бюл. hh 4 (71) Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства (72) А.Б.Терюханов и М.Г.Мазурина (53) 576,8.094,29(088.8) (56) ОаНа L, at al. Magyar Allatorvostok l apnea, 1986, 41,9. р.525 530.

Gdovfnova А., Folia veter. Koslce, 1978, а 19, р.220-221. (54) ШТАММ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО

БРОНХИТА КУР,ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ВАКЦИННЫХ ПРЕПАРАТОВ (57) Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур. Целью изобретения является повышение реактоИзобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур.

Для успешной борьбы с инфекционным бронхитом кур первостепенное значение имеет вакцинопрофилактика. Вакцинные штаммы вируса инфекционного бронхита должны иметь слабую реактогенность, быть безвредными, высокоиммуногенными и не обладать реверсибельностью при последовательных пассажах через организм прививаемых птиц.

Известны штаммы, применяемые для изготовления живой вакцины против инфекционного бронхита кур Н-120, Н-52. Необ.ЫЛ 1708839 А1 генности, безвредности и иммуногенности штамма. Вакцинный штамм АМ получен методом последовательных пассажей на развивающихся куриных эмбрионах и в культуре клеток иэ эпизоотического штамма депонирован во ВГНКИ под М 65. Штамм

AM обладает слабой остаточной вирулентностью, не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1 — 30-денвного возраста при введении в дозе 10 — 10 ЭИД5о/0,2 мл, в 50100 раз превышающей вакцинальную, При двукратном введении цыплятам 10-18дневного возраста в разведении 1:25 — 1:100 штамм АМ создает прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур референтных штаммов серотипов Массачузетс, Коннектикут, Айова-97, Айова-609 и штаммов, выделенных в СССР. рон-1, Необрон-2, Бронховак-1 и Бронховак-2. Все перечисленные штаммы относятся к одному серотипу Массачузетс. Штаммы

Необрон-1, Необрон-2, Бронховак-1 и Бронховак-2 являются адаптированными штаммами Н-120 и Н-52, депонированными в

Чехословакии и Венгрии соответственно.

Штамм Н-52 прошел 52 пассажа на куриных эмбрионах и обладает высокой остаточной вирулентностью.

Штамм Н-120 прошел 120 пассажей на куриных эмбрионах и обладает меньшей па-. тогенностью, однако при интранаэальном его применении у 60 привитых SPF-цыплят наблюдают проявление клинических признаков поражения органов дыхания.

В отечественной ветеринарной практике нет штамма, пригодного для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур.

Цель изобретения — повышение реактогенности, безвредности и иммуногенности штамма, Полученный штамм вируса инфекционного бронхита кур — сом. Coronavlrldae род

Coronavlrus, вид avian депонирован во

ВГНКИ код М 65 имеет следующие биологические и физиологические характеристики.

У зараженных эмбрионов кур 9-дневной инкубации вакцинный вирус инфекционно. го бронхита штамма АМ вызывает скручива, ние эмбриона в шар, отставание его в росте вплоть до карликовости, уплотнение амниотической оболочки. Титр вируса в экстраэмбриональной жидкости достигает

107-10 Э ИДьо/0,2 мл.

Предлагаемый штамм обладает слабой остаточной вирупентностью и не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1-ЗО-дневного возраста при введении интраназально или методом выпаивания в дозе iÎ вЂ” 10

ЭИДю в обьеме 0,2 мл. При этом указанная доза вируса в 50 — 100 раз превышает дозу, используемую при вакцинации. Поствакцинальная реакция отмечается у 8-10 g, привитых цыплят на 3 — 4 день после вакцинации, длится 7-10 дн и характеризуется слабым ринитом и чиханием.

Вирус инфекционного бронхита кур заявляемого штамма АМ с титром 10 — 10

ЭИДцо/0,2 мл при интраназальном двукратном введении цыплятам 10-18-дневного возраста в разведении 1:25 — 1:1000 создает у цыплят прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур, референтных штаммов серотипа Массачуэетс, Коннектикут, Айова-97 и Айова-609, а также штаммов, выделенных в СССР, При двукратном пероральном введении штамма

АМ, разведенного i:1000, в объеме 10 мл на цыпленка с интервалом 14 дней у цыплят также создается прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур, Пассирование предлагаемого штамма на цыплятах 1-13-,äíåâíîãî возраста на протяжении 13 последовательных пассажей без повышения вирулентности указывает на отсутствие у него реверсибепьности, Сохранение иммунобиологических свойств на протя>кении 20 последовательных пассажей на развивающихся куриных

45 эмбрионах 9-10-дневного возраста свидетельствует о стабильности штамма AM.

Для получения штамма вируса инфекционного бронхита с указанными caoAGTBBMM были выделены в птицехозяйствах страны и исследованы полевые штаммы вируса. Из них был отобран один наиболее подходящий для дальнейшей работы по получению вакцинного штамма. В результате последовательных пассажей на развивающихся эмбрионах и в культурах клеток был создан штамм вируса инфекционного бронхита кур

АМ вЂ” сем.Parvoviridae, оод Parvovirus. вид

Пример, Аттенуированный штамм AM в экспериментальных условиях был сравнен по иммуногенности с тремя вакцинными штаммами подобного типа, полученными из-за рубежа;

Штамм Н-120 серотипа Массачузетс, полученный иэ Франции.

Штамм Необрон-1 серотипа Массачузетс, полученный из Чехословакии;

Штамм Бронховак-1 серотипа Массачузетс, полученный из Венгрии.

В результате проведенных исследований было установлено, что наименьшей реактогенностью обладал отечественный штамм AM. Большей реактогенностью обладали штаммы Необрон-1 и Бронховак-1, При этом серологические исследования показали, что более высокий титр вируснейтрализующих антител к вирусу инфекционного бронхита кур отмечался в сыворотке крови цыплят, иммунизированных вирусом предлагаемого штамма. При этом они были устойчивы к зара>кению вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур как штамма

Массачузетс, полученного из Канады, так и штаммов Пудость и Чапаевский, выделенных в СССР.

Наибольшей иммуногенностью против отечественных штаммов вируса инфекционного бронхита кур обладал аттенуированный штамм AM. Безвредность антигенная активность и иммуногенность указанного штамма в лабораторных условиях была испытана на 2887 цыплятах 10 — 15-дневного возраста.

Испытания вакцинныхштаммов Н-120и

AM вируса инфекционного бронхита кур показали, что 50 -ная иммунизирующая доза штамма Н-120 составила 2630 ЭИДио/0,2 мл, а штамма АМ вЂ” 1050 ЭИДво/0,2 мл, т.е. была в 2,5 раза ниже. что свидетельствует о том, что для получения иммунизирующей дозы

Техред M.Mîðãåíòàë Корректор M.Øàðoøè

Заказ 403 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва„Ж-35, Раушская, наб;, 4/5

Производственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 штамма AM требуется в 2,5 раза меньше материальных затрат, чем для получения иммунизирующей дозы штамма-прототипа

Н-120, Формула изобретения

Штамм вируса инфекционного бронхита кур ВГНКИ М 65 для приготовления вакцин ных препаратов.

Птицеводство является одной из самых популярных отраслей сельского хозяйства, по причине своей высокой прибыльности. Однако в данном виде деятельности существуют определенные риски, связанные с различными болезнями пернатых.

Одним из самых серьезных заболеваний кур считается инфекционный бронхит, зачастую приобретающий эпидемиологический характер. Каждый птицевод обязан знать симптомы этого заболевания и способы лечения своих питомцев.

Что такое инфекционный бронхит

Инфекционным бронхитом кур (ИБК) называют заболевание, вызывающее поражение органов дыхания, особенно у молодняка. Для кур-несушек недуг опасен осложнением, связанным с нарушением репродуктивности. Нередко у заболевших питомцев наблюдается нефрозонефритный синдром, выражающийся в опухоли почек.

Инфекционным бронхитом кур (ИБК) называют заболевание, вызывающее поражение органов дыхания.

Возбудителем болезни является сложноорганизованный вирус семейства Coronaviridae, содержащий PHK. Обладает устойчивостью к внешней среде, не боится холода. Однако при температуре 37 градусов вирус погибает в течение суток, а при повышении температуры до 56 градусов – в течение 30-120 минут.

Владельцам птицеферм данное заболевание приносит серьезный экономический ущерб, связанный, в первую очередь, со значительным снижением продуктивности больных особей. Даже в том случае, если птицу удалось вылечить, низкая яйценоскость сохраняется на протяжении всего репродуктивного периода жизни.

Кроме того, снесенные во время болезни яйца нельзя использовать для воспроизводства потомства, а зараженные цыплята неспособны к полноценному развитию и подлежат выбраковке.

Впервые инфекционный бронхит у домашней птицы был классифицирован и описан в США в 1930 году, но причину недуга установить не удалось. Вирусная природа заболевания была определена в 1932 году. По мере развития птицеводства, заболевание распространялось в разных странах и континентах.

После бронхита низкая яйценоскость сохраняется на протяжении всего репродуктивного периода жизни.

В СССР заболевание было завезено с племенными породами домашних птиц, а первое диагностирование зараженного потомства было произведено в 1955 году. Сначала различалось всего 2 штамма вируса, но сейчас насчитывается около 30 типов возбудителя болезни.

Наиболее распространенными являются: штамм QX-аналог, 793B, Macc, Арканзас и некоторые другие.

Как передается заболевание

Заразиться вирусом может особь любого возраста, но к основной группе риска относятся цыплята в возрасте до 1 месяца. Источником заболевания являются зараженные куры. Опасность представляют и те особи, которые были вылечены, но являются носителями возбудителя. Таковыми они являются в течение 3 месяцев после собственного выздоровления.

Вирус может передаваться с различными органическими выделениями:

  • пометом;
  • петушиным семенем;
  • жидкостью из носа.

Куры могут заразиться при кормлении, через воду, насесты, а также аэрогенным путем. В роли переносчиков вируса могут выступать и люди, также являющиеся чувствительными к данному возбудителю. Основной пик заболевания приходится на весну и лето, при этом часто сопровождается другими инфекционными болезнями.

Куры заражаются через корм, поилки, кормушки.

Справка. Степень распространения болезни зависит от возраста, породы, рациона птиц, а также их концентрации в птичнике. Большое влияние оказывают сопутствующие вирусные и бактериальные инфекции.

В организме переболевших особей образуются антитела, обеспечивающие дальнейший иммунитет к определенному штамму вируса. Однако время их действия ограничено сроком около полутора лет. Антитела передаются и потомству, однако их иммунитет к вирусу менее активен и не является полноценной защитой.

Симптомы инфекционного бронхита

Инкубационный период заболевания колеблется от 36 часов до 10 суток. Инфекционный бронхит кур проявляется респираторной симптоматикой, сопровождаемой другими характерными симптомами. Принято также разделять признаки болезни у молодняка и взрослых кур.

Цыплят беспокоят следующие симптомы:

  • затруднение дыхания и кашель;
  • нарушение аппетита;
  • потеря веса;
  • конъюктивит;
  • искривленность шеи;
  • заметное опущение крыльев.

Куры, больные инфекционным бронхитом, несут яйца с мягкой скорлупой.

У взрослых особей присутствуют такие признаки, как:

  • свистящие звуки при дыхании;
  • диарея с выделениями зеленого цвета;
  • существеннее понижение носкости яиц;
  • снесенные яйца имеют мягкую скорлупу.

Самые заметные признаки ИБК имеют респираторную природу, поэтому их часто принимают за банальную простуду. Самым частым и значительным осложнением заболевания является поражение почек, что проявляется диареей.

Внимание. В некоторых случаях бронхит не имеет явных признаков, отмечаются лишь периодические хрипы. Если это происходит на фоне значительного снижения продуктивности, то велика вероятность присутствия в организме питомцев болезнетворного вируса.

ИБК: патологоанатомические изменения

При вскрытии трупов цыплят обнаруживаются многочисленные кровоизлияния в бронхах и трахее. Наличие катарального или серозного экссудата свидетельствует об имевшем место воспалении. У взрослых особей обнаруживается недоразвитый яичник, часто с признаками кровоизлияния. Яйцевые фолликулы нередко атрофированы, а в яичнике присутствуют кисты.

Для диагностики ИБК у погибших кур исследуют внутренности.

При тяжелом течении ИБК, воспалительные процессы приводят к значительной отечности слизистых оболочек и инфильтрации цилиндрического эпителия. Нефрозонефритный синдром характерен набуханием почек и своеобразной пестротой их рисунка. В мочевых канальцах и на серозных покрытиях некоторых внутренних органов обнаруживается переизбыток уратов.

Диагностика ИБК

Для постановки точного диагноза производится ряд исследований:

  1. Клинических.
  2. Эпизоотологических.
  3. Патологоанатомических.

Инфекционный бронхит у кур плохо поддается диагностике, поскольку существуют многочисленные заболевания с аналогичной этиологией:

Также нередки случаи отсутствия явных симптомов данного заболевания, но со значительным падением продуктивности. Для точного определения болезни, вызывающей определенные симптомы, проводятся лабораторные исследования. Для этой цели берутся смывы с гортани и трахеи у живых особей, а в случае их гибели – соскобы как с указанных органов, так и с почек и легких.

У больных кур берут кровь на анализ и смывы с гортани.

При подозрении на ИБК, у пернатых пациентов каждые две недели берется кровь на сыворотку.

Проводятся также серологические исследования, включающие в себя:

  • иммуноферментный анализ;
  • молекулярно-биологические исследования;
  • реакцию нейтрализации эмбрионов для определения вида вируса;
  • непрямую гемагглютинацию.

Только комплексная диагностика позволяет поставить точный диагноз с установлением типа возбудителя. Лечение осуществляется в соответствии с результатами всех исследований и анализов.

Способы борьбы и лечение

При подозрении на ИБК необходимо изолировать заболевших кур от здоровых особей, поскольку заболевание очень легко передается, особенно некоторые вариантные штаммы. Для лечения этого заболевания рекомендуется общая антивирусная терапия. Однако по-настоящему эффективного средства против этого недуга до сих пор не найдено.

Основным методом борьбы с ИБК является его профилактика. Для этой цели широко используется распыление дезинфицирующих средств.

Для лечения инфекционного бронхита применяют спреи и растворы Люголя.

Существует несколько видов таких препаратов:

  1. Глютекс.
  2. Йодид алюминия.
  3. Хлорскипидар.
  4. Раствор Люголя.

В курятнике обрабатывается пол, стены и потолок. В помещении должна быть обеспечена хорошая вентиляция воздуха, но при этом важно соблюдать установленную температуру.

Важно. Реализация яиц из неблагополучного птичника возможна только после их дезинфекции с помощью паров формальдегида. Хозяйство может быть признано благополучным только через 3 месяца после последнего случая заболевания.

К мерам профилактики относится и повышение иммунитета птиц. Чтобы этого достичь, необходимо соблюдение правильного питания, содержащего должное количество витаминов и микроэлементов. Большое значение в предотвращении заболевания имеет и своевременная вакцинация.

Вакцина Праймер: схема вакцинации

Одним из наиболее эффективных видов вакцинации против различных штаммов ВБК признана вакцина Пулвак IB Праймер. Применяется методом распыления и в виде добавления в питье птиц. Вода для вакцинации должна быть свежая, без ионов железа и хлора, комнатной температуры.

Вакцина Пулвак IB Праймер является эффективным профилактическим препаратом.

Энтеральный метод

Объем воды на одну дозу зависит от возраста цыплят и составляет 2-3 мл для 1-3 суточного возраста, и 4-6 мл для особей в возрасте 18 суток. Вакцина смешивается с водой, а затем в полученную смесь добавляется сухое молоко из расчета 4 г на 1000 мл.

Цыплята бройлерных пород не должны пить воду в течение 2 часов перед вакцинацией, а цыплята яйценосных пород должны бороться с жаждой не менее 4 часов.

Поилки с вакциной должны быть надежно защищены от солнечного света. Употребление чистой воды допускается лишь после полного употребления раствора вакцинирующимся поголовьем.

Метод распыления

Концентрация раствора данного типа вакцинации также зависит от возраста питомцев и составляет от 250 мл до 1000 мл воды на 1000 доз. Вакцинацию производят в птичнике с помощью распылителей. При этом необходимо отключить систему вентиляции и обогрева. Если цыплятам суточные, их помещают в ящики и распыляют вакцину над ними.

Вакцинацию можно проводить в курятнике методом распыления.

Если вакцинация проведена в достаточном объеме, перья птиц должны быть равномерно увлажнены. После проведения процедуры проветривать помещение нужно не ранее, чем через полчаса. Побочных реакций при применении вакцины выявлено не было, при передозировке препарата случаев заражения не отмечалось. Не допускается применять вакцинацию к больным и ослабленным особям.

На правах рекламы

Гирин М.В., Сурнев Д.С., Лозовой Д.А., Ельников В.В.
(ОАО «Покровский завод биопрепаратов», Владимирская обл.)

Резюме
На основе данных эпизоотического мониторинга распространения вируса инфекционного бронхита кур (ИБК) на территории РФ научно обоснована стратегия выбора компонентного состава ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против НБ, ИБК и ССЯ-76, содержащей полиштаммную композицию по компоненту ИБК. Вакцина содержит вирусы ИБК антигенно родственные серотипу Массачусетс, 793/В, российскому варианту и предназначена для бустерной вакцинации промышленной и родительской несушки в птицехозяйствах, где циркулируют вариантные штаммы вируса ИБК. При изготовлении вакцины используются эмбрионы от СПФ-кур. Испытания полученной вакцины показали ее высокую иммуногенность и низкую реактогенность, что позволяет обеспечивать длительный и напряженный иммунитет, а также передачу материнских антител потомству.

Введение
Инфекционный бронхит кур (ИБК) является высококонтагиозным заболеванием, наносящим существенный ущерб промышленному птицеводству. Вирус ИБК поражает верхние дыхательные пути, репродуктивные органы и вызывает нефрозо-нефриты. У взрослых несушек отмечают спад яичной продуктивности, деформацию и обесцвечивание скорлупы, разжижение яичного белка и снижение выводимости [2].
Возбудитель ИБК – коронавирус – чрезвычайно изменчив. Небольшие замены в гене S1 приводят к появлению новых антигенных вариантов вируса [2, 4].

Проведенный в 2003-2004 г.г. на территории РФ мониторинг с помощью ОТ-ПЦР и секвенирования указывает на доминирующее распространение изолятов (около 40%) генотипа Массачусетс. Также довольно часто (5-15%) встречаются изоляты генотипа 793/В, D274, QX, B1648. Кроме того, 27% проб не были отнесены к ранее известным генотипам и составили российскую группу [1]. При дальнейшем мониторинге в 2006 г. был выявлен полевой изолят вируса ИБК, относящийся к генотипу Арканзас [1]. Данное распределение изолятов на территории РФ несколько отличается от распределения на территории ЕС, где доминирует генотип 793/В (33%) , Массачусетс (25%) и Италия-02 (13%) [5].

Рис. 1. Распределение генотипов вируса ИБК на территории РФ и ЕС в 2006 г.

В дальнейшем возможно изменение картины распределения в связи с глобализацией птицеводства и завозом молодняка птицы из-за рубежа, преимущественно из Европы, а также в результате участившегося использования вакцин на основе серотипа 793/B и D274 импортного производства, которые могут послужить причиной возникновения полевых вирусов ИБК [4].

Как правило, защита птицепоголовья основана на применении живых и инактивированных вакцин против ИБК из штаммов серотипа Массачусетс. Их протективная активность против гомологичных полевых изолятов хорошо изучена, однако они обеспечивают лишь частичную защиту от заражения вариантными вирусами ИБК (70% защиты от вирусов, относящихся к группе QX, 60% — от австралийских вариантов) [3].


Рис. 2. Эффективность защиты птицы, привитой вакцинами серотипа Массачусетс.

В связи с этим перед нами стояла задача создания вакцинного препарата для несушек и родителей не только обеспечивающего защиту от особоопасных (НБ) и распространённых заболеваний (ИБК, ССЯ-76), но и создающего надежную защиту от вирусов ИБК, не принадлежащих к серотипу Массачусетс и составляющих больше половины российских изолятов.

Материалы и методы
Вирусное сырье:
Вирусы ИБК.
При изготовлении серии вакцины были использованы штаммы «Чапаевский», «Таганрогский» и «Калужский», антигенно родственные серотипу Массачусетс, 793/B и российскому варианту, соответственно.

Вирусы ИБК культивировали в развивающихся эмбрионах СПФ-кур (Lohman Tierzucht, Германия), инактивацию проводили β-пропиолактоном. Инфекционная активность вирусов ИБК до инактивации была не ниже 7,0 lg ЭИД50/см3.

Вирус НБ. Использован штамм «Ла-Сота» с активностью в РГА не ниже 9 log2. Вирус культивировали в развивающихся эмбрионах СПФ-кур (Lohman Tierzucht, Германия), инактивацию проводили β-пропиолактоном.

Вирус ССЯ-76. Использован штамм «B8/78» с активностью в РГА не ниже 15 log2. Вирус культивировали в развивающихся эмбрионах уток, инактивацию проводили β-пропиолактоном.

Масляный адъювант: при изготовлении вакцин использован адъювант Montanide ISA 70 VG (SEPPIC, Франция).

Подопытная птица: использовали цыплят кросса Хай-Лайн-98 90-суточного возраста из промышленного птицехозяйства. На птицефабрике птица была трёхкратно привита против ИБК живой вакциной из штамма Н-120 и двукратно против НБ вакциной из шт. Ла-Сота методом выпойки. Образцы испытуемых вакцин вводили в грудную мышцу по 0,5 см3. В опытных и контрольной группах было по 25 голов.

Контроль иммунитета. Антитела к вирусу ИБК определяли методом ИФА на наборах Synbiotics, для определения титров антител к НБ и ССЯ-76 использовали РТГА, которую проводили согласно общепринятой методике.

Результаты и обсуждение
Средние титры антител по опытным и контрольной группам представлены в табл. 1.

Таблица 1
Формирование иммунного ответа на введение образцов ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против НБ, ИБК и ССЯ-76

*Примечание: н.о. – не обнаружено

Как видно из таблицы 1, экспериментальный образец полиштаммной вакцины и серийная вакцина показали высокую иммуногенную активность. Вируснейтрализующие антитела в защитных титрах формировались на 28 день после вакцинации. После выхода на максимальный уровень на 60 сутки после прививки, титры антител плавно снижались и обеспечивали требуемый протективный уровень по всем прививаемым компонентам до 300 дней после прививки. В контрольной группе уровень антител существенно не увеличивался (р Образцы вакцины были безвредны и не вызывали выраженной и длительной воспалительной реакции в месте введения.

Вариантные штаммы вируса инфекционного бронхита кур

Инфекционный бронхит кур (ИБК) вызывается вирусом семейства коронавирусов, представлен одноцепочечной РНК. Известно, что вирус ИБК легко мутирует, что ведет к изменениям в его антигенном составе. Эти изменения часто приводят к снижению эффективности существующих вакцин, увеличению патогенности вируса, а также к экономическому ущербу. Считается, что разница в 5% или более в нуклеотидной последовательности на гипервариабельном участке S1 спайк-белка вируса ИБК указывает на новый вариант.

Что такое вариант ИБК? Варианты ИБК — это высоковирулентные штаммы, обладающие низкой чувствительностью к вакцинам, эффективным до их появления. Они часто служат причиной появления новых и серьезных клинических проявлений у кур. Превалирование некоторых вариантов эндемично в отдельных географических областях. Они могут персистировать в течение некоторого времени и исчезнуть позже. Другие варианты могут стать доминирующими и быстро распространяться на большие расстояния. Чтобы справиться с вариантами такого характера, нужны новые вакцины. Почему некоторые варианты ИБК в течение короткого времени распространяются по огромным территориям — любопытный вопрос. Возможно, что вирус ИБК (или близкие по структуре вирусы той же группы) инфицирует диких птиц, которые, в свою очередь, заражают коммерческую птицу в других странах (De Wit et al. … . Av. Path., 2011).

Специфическая вирулентность и/или другие характеристики варианта ИБК позволяют ему оставаться долгое время на одной и той же территории, а иногда и распространяться по миру, становясь доминантным штаммом. Таким образом, необходимо вакцинировать против тех вариантных штаммов, присутствие которых на территории приводит к клиническим, субклиническим проявлениям и экономическому ущербу и которые не контролируются другими вакцинами.

Сколько вариантных штаммов существует?

ИБК впервые описан около 80 лет назад, в 1930-е гг. Первым широко распространенным штаммом был Массачусетс (М41), а первым вариантным штаммом ИБК — штамм Коннектикут (Конн), обнаруженный в 1951 г. Первым зарегистрированным нефропатогенным штаммом стал австралийский изолят Т64. В 1970-е гг. и позже были изолированы несколько вариантов в США, среди которых штаммы JMK, Хольт, Грей, Айова, Флорида. Эти штаммы бесследно исчезли в течение нескольких лет. В 1973 г. Филдс описал новый вариант — Арканзас (Ark DPI), ставший преобладающим штаммом, защита от которого потребовала создания отдельной специфической вакцины. Позже были зарегистрированы другие варианты — в 1992 г. в Делавэре (Del 072, Gelb) и Калифорнии (CAV in 2003). В 1994 г. появились подтипы штамма Ark DPI, один из них — рекомбинант, имеющий в своем белке S1 части Ark и части Массачусетс М41.Следующим преобладающим вариантом стал Джорджия (GA98 Джеквуд 2001), для защиты от которого также требовалась новая вакцина. А уже в 2003 г. Джеквуд описал субвариант GA98 (GA08).

В Университете Джорджии М.У. Джеквуд выделил 82 полевых варианта ИБК, которые были собраны в течение 10 лет (1994–2004 гг.). ИБК распространен повсеместно. Вирус присутствует везде, где существует птицеводство. Популяция домашней птицы во многих странах мира велика и продолжает увеличиваться, что позволяет РНК вируса бесконечно реплицировать, мутировать, изменяя свои антигенные свойства. Именно поэтому мы не знаем, сколько вариантов существует во всем мире, но уверены в том, что их очень много.

На какие вариантные штаммы следует обращать особое внимание

США. Штамм Ark имел высокую вирулентность и причинял большой экономический ущерб. Вакцины Ark используются до сих пор. Штамм Ark имеет некоторые общие антигенные свойства с предыдущими вариантами, включая Хольт, Грей, JMK и Флорида, что, возможно, является причиной исчезновения этих вариантов после вакцинации против Ark. Этот пример служит иллюстрацией того факта, что некоторые варианты долгое время персистируют в промышленном птицеводстве определенного региона, тогда как другие появляются и исчезают.

Хольт, Грей, JMK, Флорида, Айова

Джорджия, Делавэр, Калифорния

GA98, Del 072, CAV

Подтипы Ark, GA 08

Европа. В Европе первые вариантные штаммы (D1466 и D274) были выделены в Голландии в 1980-е гг. В 1990-е гг. в Великобритании и Франции был обнаружен новый вариант (783B, 4/91, CR88), который быстро распространился по ЕС, а позже — по всему миру, за исключением США. В 2005 г. итальянский штамм (IT-02) нанес тяжелый экономический ущерб и распространился в другие европейские страны.

Европейский вариант ИБК

Большая часть ЕС

Китай. В Китае вариант QX стал доминирующим штаммом в 1996 г. К 2001 г. он распространился в Россию и был выделен в Западной Европе в 2003–2004 гг. Штамм QX эволюционировал до А2 в Китае, а позже стал подтипом LX4. Изоляты, родственные китайскому QX, сегодня находят в большинстве стран мира.

Китайская классификация ИБК на 7 генотипов

QXIBV, LX4, CK/CH/LLN/061 (Китай)

793B, 4/91, CR88, Италия 02 (Европа), Var 1 (Израиль)

TW1171/92, TW2575/98 (Тайвань)

Грей, Хольт, Cal99 (USA), T64 (Австралия)

Mass (США), H120, H52, Ma5, 28/26 (ЕС)

Q1, J2, T3, 2992/02, CK/CH/LDL/97I

Латинская Америка. Штаммы Mass. и Conn. были обнаружены в большинстве стран Латинской Америки еще в 1950-х гг. Различные варианты местных генотипов регистрировали в Бразилии, Чили, Мексике и Аргентине. Несмотря на значительный экономический ущерб вследствие инфицирования локальными вариантными штаммами ИБК, единственной лицензированной вакциной в настоящее время является вакцина Mass. + Conn.

Ближний Восток. Вариант 1 (233) был выделен в Израиле и оказался очень близким к штамму 4/91 группы 793В. Вариант 2 был выделен в Израиле в 1996 г., а его модифицированный подтип (206) — в 2006 г. Вариант 2 в настоящее время широко распространен в странах Ближнего Востока (Израиль, Египет, страны Персидского залива, Иран, Турция). В этом случае мы в очередной раз отмечаем, что некоторые штаммы (720, 885) появлялись и исчезали, возможно, вследствие доминирования родственных вариантов (Вариант 1 и Вариант 2-06).

Варианты ИБК Ближнего Востока

Вариант 1 (793B), Израиль

233 (близок к 4/91)

Вариант 1 и Вариант 2, Израиль

близок к Варианту 2

близок к Варианту 1

близок к QX & IT-02?

Вариант 2, sub type

Как справиться с вариантом ИБК? Этот вопрос возникает каждый раз, когда появляется новый штамм ИБК и эффективность защиты при использовании прежних вакцин снижается. Первое, что нужно сделать, — убедиться, что выбранная вакцина применяется правильно и эффективно. Марк Джеквуд изучил проблемы, возникающие вследствие неправильного применения вакцин ИБК, например при назначении их методом выпаивания или методом распыления. Было доказано, что достаточно часто причиной неудовлетворительной защиты становится неправильное введение вакцины и условия ее хранения. Если же вакцинация была проведена по правилам, но в вакцинированном стаде тем не менее наблюдаются клинические, патологические признаки и продолжается падеж, следует изолировать вирус и тщательно изучить его в компетентной лаборатории. Необходимо провести расширенную лабораторную диагностику с помощью ПЦР-РВ, чтобы охарактеризовать выделенный штамм. Уже на этом этапе следует провакцинировать стадо имеющимися в наличии альтернативными вакцинами. Если и это не решило проблемы, необходимо провести генотипирование, чтобы проверить, насколько близок или далек полученный изолят от имеющегося вакцинного штамма. С помощью генотипирования проверяется большая доля гликопротеина S1 вируса. Однако в нашем случае необходимо проверить полностью всю нуклеотидную цепочку участка S1, поскольку при проведении неполного секвенирования возможны ложные интерпретации.

Если новый изолят будет отличаться от предыдущих штаммов, превалирующих в регионе ранее, а клинические и экономические проблемы останутся неразрешенными, вакцинация гомологичным штаммом окажется лучшим или единственным решением проблемы. Очевидно, что разработка новой вакцины — достаточно трудоемкая и долгосрочная задача. Требуется приложить немало усилий для оценки эффективности и безопасности новой вакцины. Именно по этой причине на сегодняшний день разработаны и запущены в серийное производство лишь несколько вакцин для борьбы с новыми вариантными штаммами.

Какие вакцины использовать против каких вариантов? В США текущие программы вакцинации включают один или более вариантов Ark DPI, Del012 и GA98 или GA08. В Европе и большинстве других стран широко используются варианты 793B (4/91, CR88, Var I — Israel). В Китае — группа вариантов QX. На Ближнем Востоке — 793B, а недавно возникла необходимость в использовании Var 2-06 (IS 1494/06).

В августе 2015 г. штамм Вариант 2 был изолирован в Литве, а в ноябре — уже и на Украине. По последним данным, он зафиксирован и в России. В ходе эпидемиологических исследований определили, что в этих регионах Вариант 2 стал доминирующим и подавил распространение других штаммов.

Этот уникальный высокопатогенный вирулентный вирус быстро охватывает обширные территории по всему миру. Учитывая стремительно возрастающее инфекционное давление вируса ИБК типов QX и 793B и новых вариантных штаммов типа Вариант 2 в Европе, на Ближнем Востоке и в России, компания Phibro Animal Health Corporation (США) разработала живую аттенуированную вакцину Tabic IB VAR 206 ® . Ее создали на основе полевого штамма Вариант 2 (IS/1494/06), чтобы контролировать заболеваемость и минимизировать экономический ущерб, причиняемый этим вирусом. Вакцина Tabic IB VAR 206 ® производится по запатентованной и принадлежащей компании Phibro технологии TAbiс — производство живых вакцин в форме стерильных водорастворимых таблеток. Данная технология получила широкое мировое признание и используется другими компаниями для лицензионного производства похожих продуктов.

Резюме. Непрекращающиеся модификации вируса ИБК будут еще долгое время заставать нас врасплох. Перед нами стоит важная и серьезная задача профилактики ИБК, поэтому мы должны быть всегда начеку, имея инструменты для борьбы в условиях нехватки времени. Достоверная и оперативная передача информации между птицефабриками, научно-исследовательскими институтами и лабораториями сократит время реагирования на новые эпидемиологические угрозы.

[Avian Infectious Bronchitis, Infectious Bronchitis of baby Chicken (англ.); Infectiose Bronchitis des Huhnes, Austeokende tracheobronchitis der Kuken (нем.); Bronchite Infectiouse (франц.)]

Инфекционный бронхит (ИБ) — болезнь, поражающая кур. У цыплят проявляется респираторным и уремическим синдромами, у кур — поражением герминативных органов, что ведет к длительному снижению яйценоскости. Болезнь встречается во всех странах, где птицеводство поставлено на промышленную основу.

Впервые вирус выделили Бич и Шалк в США в 1936 г. ВИБ — первый, описанный в литературе коронавирус птиц и первый коронавирус, в геноме которого полностью определена последовательность нуклеотидов. Сравнение нуклеотидной последовательности генов нуклеокапсида трех штаммов ВИБ (Grey, Arcansas 99 и Holland 52) свидетельствует об их высокой консервативности (гомология 91,1—96,5).

Симптомы и патологоанатомические изменения. Отмечают три клинических синдрома: респираторный, нефрозно-нефритный и репродуктивный.

Респираторный синдром проявляется у молодняка и характеризуется кашлем, трахеальными хрипами, носовыми истечениями, затрудненным дыханием (с открытым клювом), иногда конъюнктивитом, ринитом и синуситом. Высокая летальность наблюдается, главным образом, среди цыплят до месячного возраста, у 2—3-месячного молодняка она может достигать 90 %, но чаще бывает в пределах 10—35 %. У цыплят 30—60-дневного возраста болезнь протекает, как правило, хронически и в ассоциации с колибактериозом и микоплазмозом. При патологоанатомическом вскрытии обнаруживают серозный, катаральный или казеозный экссудат в трахее или бронхах.

Некоторые штаммы вируса обладают нефротропностью (нефрозно-нефритный синдром) и могут в течение первых двух недель поражать почки и мочеточники с отложением уратов. Течение болезни — острое. У больных птиц отмечают депрессию и диарею с примесью уратов. При первичной циркуляции вируса в хозяйстве летальность птицы достигает 50—70 %. При патологоанатомическом вскрытии обнаруживают набухание почек и пестроту рисунка. Микроскопические изменения варьируют от нефрита до некротического нефроза.

Выделенный в Китае местный штамм D IBV вызывал тяжелое опухание железистого желудка у цыплят. В электронном микроскопе были выявлены вирусные частицы, которые были покрыты оболочкой и имели характерные булавовидные выпячивания по поверхности. Диаметр вирионов был около 80—140 нм. Аллантоисная жидкость инфицированного куриного эмбриона после обработки 1 % Трипсином в течение одного часа обладала гемагглютинирующей активностью. Гибель эмбрионов и их карликовость увеличивались после серийных пассажей. К 5-му пассажу наблюдались характерные изменения эмбриона, который округлялся, амнион утолщался и тесно прилегал к нему, эмбрион переставал расти и погибал. Тот же вирус выделялся от 10-дневных SPF цыплят при тяжелом провентрикулите, индуцированным после введения суспензии пораженной ткани железистого желудка от погибших цыплят.

Поражение репродуктивных органов (репродуктивный синдром) регистрируется обычно у кур старше 6 месяцев. Заболевание протекает бессимптомно или с незначительным поражением органов дыхания. Единственным проявлением болезни в этих случаях является длительное снижение яйценоскости на 30—80 %, которое зависит от возраста птицы. В дальнейшем яйценоскость восстанавливается, но не достигает прежнего уровня. Больные куры несут мелкие, неправильной формы яйца с тонкой скорлупой. При патологоанатомическом исследовании кур, переболевших ИБ в раннем возрасте, часто наблюдают инфантильное состояние всего яйцевода, недоразвитость яйцевых фолликул.

В крупных птицехозяйствах ИБ имеет стационарный характер и протекает как хроническая инфекция без ярко выраженных симптомов поражения респираторных органов; цыплят в более уязвимом возрасте (1—30 дней) в значительной степени защищает пассивный иммунитет. Поражение репродуктивного тракта у цыплят и кур неизбежно приводит к снижению яйценоскости. Только вирусологические исследования и анализ экономических показателей выращивания цыплят и продуктивности кур дают возможность диагностировать ИБ, протекающий хронически или в ассоциации с другими болезнями.

Острое течение ИБ характеризуется контагиозностью, массовой заболеваемостью, значительным снижением продуктивности, проявлением респираторных признаков болезни и появлением деформированных мелких яиц.

Морфология и химический состав. Анализ последовательностей гена S1 австралийских штаммов ВИБ Позволил идентифицировать две генотипически различных группы. Шт. VicS, V5/90, N1/62, N3/62, N9/74 и N2/75 относятся к группе I. Все штаммы группы 1 способны размножаться в трахее и почках, но только четыре из них (VicS, N1/62, N9/74, и N2/75) являются нефропатогенными с летальностью 32—96 %. К группе 2 отнесены шт. N1/88, 03/88 и V18/91, которые размножаются лишь в трахее и не ведут к гибели птицы. Идентичность аминокислотной последовательности при сравнении трех штаммов составляла 72,3 — 92,8 %, при сравнении с вирусами группы 1 — 53,8 — 61,7 %. Данные штаммы отличаются также от шт. Массачусетс 41 и Д1466 (идентичность 47,5 — 55,7 %). Штаммы N1/88, 03/88 и VI8/91 образуют новую группу вирусов, генотипически отличающуюся от всех, ранее охарактеризованных. Не установлено корреляции между аминокислотной последовательностью S1 и нефропатогенностью. Морфологически ВИБ типичный коронавирус.

В трупах павшей птицы вирус быстро теряет инфекционную активность; в питьевой воде при комнатной температуре он сохраняется 11 ч; в пораженных тканях, в 50 %-ном растворе глицерина при температуре 4 °С — до 80 дней; в аллантоисной жидкости при температуре 37 °С — 3 дня, при 20—30 °С — 24 дня, при 4 °С — 427 дней, при -25 °С — 537 дней. В инфицированной аллантоисной жидкости при температуре -30 °С вирус активен 17 лет.

Большинство штаммов ВИБ кур инактивируется за 10 мин при 56 °С, однако среди них встречаются варианты, различающиеся по терморезистентности. Все штаммы ВИБ относительно резистентны к кислой среде (рНЗ,0) и чувствительны к щелочной среде (рНП), чувствительны к хлороформу и дезоксихолату натрия. Некоторые из них (Ве-42 и Connauqht) после обработки эфиром обладают остаточной инфекцион-ностью. По чувствительности к эфиру и прогреванию при 45 °С в течение 90 мин все штаммы ВИБ разделены на три группы: первая группа включает Ве-42 и Connauqht — штаммы, чувствительные к двум обработкам; вторая группа включает шесть штаммов, которые относительно резистентны к эфиру, но чувствительны к прогреванию при 45 °С в течение 90 мин; в третью группу входят шт. В-41 и КН, которые резистентны к эфиру и прогреванию. При лиофилизации все штаммы резистентны к трипсину, очень чуствительны к ультрафиолетовому облучению. Глюкоза (10 %-ный раствор) стабилизирует вирус. Под действием УФ-лучей ВИБ разрушается через 18—24 ч. Солнечные лучи инактивируют его при 36—38 °С за 3 ч; 1 %-ные растворы фенола, крезола, формалина, 70 %-ный этиловый спирт и р-р соды (1:10000) обезвреживают в течение 3 мин.

Антигенная структура. ВИБ имеет два гликопротеина: поверхностный S и мембранный М. Белок SP этого вируса состоит из двух гл и ко протеидов SP1 и SP2, образующихся в результате посттрансляционной модификации. Пепломерный белок путем протеолиза был разделен на две части: N-терминал S1 и С-терминал S2 гликопепти-да. Белки ВИБ различаются по тканевому тропизму. Изменение патогенности штаммов вируса связано с изменением изоэлектрических точек их белков, поэтому классификация белков на основе изоэлектрических точек позволяет идентифицировать высокопатогенные и персистентные штаммы. У четырех английских штаммов, принадлежащих к трем разным серотипам ИБ, Sl-белки различаются по аминокислотному составу только на 2—3 %. Их аминокислотные последовательности были также очень близки аминокислотным последовательностям Sl-белков трех голландских изолятов (D207, D274 и D3896). С использованием 16 монАТ были обнаружены общие эпитопы ВНА у всех 8 изолятов, хотя поликлональные сыворотки дифференцировали их только на три серотипа. Эпитопы ВНА локализованы на первой и третьей четвертях S1 — белка. Серологические, эпизоотологические исследования ИБ должны быть дополнены анализом данных по секвенированию нуклеиновой кислоты и по взаимодействию с монАТ. Белки S, М и N ВИБ имеют мол. м. 84-87, 90-91 и 27-30 кД соответственно. Различают несколько европейских (z4) и американских (z4) серотипов, АГ связанных между собой. Сероспецифические эпитопы вируса локализованы, в основном, в первых 300 аминокислотных остатках пепломерного белка S. На поверхности ВИБ обнаружено пять АГ эпитопов: А, В, С, D и Е, из которых первые четыре ответственны за нейтрализацию вируса. Из 16 монАТ все реагировали с белками пепломеров, а один тип AT нейтрализовал инфекционность и подавлял ГА-активность вируса.

Антигенная активность, антигенная вариабельность и родство. Переболевание птицы сопровождается образованием анти-ГА, ВНА и практически пожизненным иммунитетом к гомологичному типу вируса. АГ-свойства вируса ассоциированы с шипами вирусной мембраны, состоящими из ди — и тримерного белка пепломера Е-2. Эти свойства связаны с субъединицей S1. Кроме основного белка S, у ВИБ в меньшей степени участвует в индукции ВНА также и белок М, он ответствен за синтез ингибиру-ющих ГА AT. Гуморальные ВНА появляются через 2 недели после заражения, между 6 — 8-й неделей титр их достигал максимума и далее до 20-й недели оставался постоянным, после чего снижался. У кур-реконвалесцентов ВНА обнаруживались через 482 дня.

ПА появлялись в сыворотке крови через 2—3 недели, но исчезали раньше, чем ВНА. При повторном заражении уровень ПА повышался. У экспериментально инфицированных 8-недельных цыплят они были выявлены на 10-й день и сохранялись в течение 10—14 дней, после чего процент цыплят, положительно реагирующих в РДП, постепенно снижался. Через месяц после заражения только 39,5 % цыплят имели ПА, а через 2 месяца они не были выявлены ни в одной исследованной сыворотке. В крови кур-реконвалесцентов найдены КСА.

Показана АГ — и иммуногенная вариабельность полевых штаммов ВИБ. Четко определены семь серотипов: A(D207), B(D3896), C(D3128), D(D212), Массачусетс (Mass), ИК11 и ИК12. В пределах указанных серотипов известны следующие штаммы: Массачусетсе, Коннектикут А5968, Айова-97, Айова-609, Грей, Холт, УМК Армиленд, Брисбеин, КН, Нерима, Ишида, Шида.

Выделен АГ вариант вируса, который отнесен к типу Индиана, и новый нефропа-тогенный АГ отличный вирус Р-84084. Антисыворотка к шт. Коннектикут А5968 нейтрализует все вышеуказанные гетерологичные штаммы, за исключением шт. Ишида. С помощью фингерпринтного анализа (теста «отпечатки пальцев») нуклеотидов РНК датских штаммов выделены две группы вирусов. В 1-ю группу из них вошли шт. Н52, Н120, D387, 1259, 1385, 1397, у которых установлено 99 % гомологии; во 2-ю — шт. D207, D274, D212, D1466, D3128, D3896, имевшие 95 % гомологии. Большинство выделенных в Нидерландах полевых изолятов ВИБ отличались по АГ составу от серотипов Массачусетс и датских серотипов D274, D1466, D3128. Поэтому возникла необходимость создания новой вакцины. Выделенные в нашей стране штаммы вируса в большинстве случаев имели родство с серотипом Массачусетс и значительно реже встречались штаммы, относящиеся к серотипу Коннектикут.

Проведено исследование генетических различий у изолятов вируса инфекционного бронхита (ВИБ), выделенных от цыплят — бройлеров в штате Миссисипи — амплификация и секвенирование сегмента в 582 пары оснований терминальной части гена S1 нуклеотидного белка 26 изолята типа Арканзас. Р-ПЦР И цикл секвенирования использовали для выявления генетической расшифрованной аминокислотной взаимосвязи между изолятами. Проведенный анализ показал, что нуклеотидные и аминокислотные последовательности изолята из Миссисипи были высоко консервативны и уровень их нуклеотидной гомологии оказался выше и составил 99,4 %, а аминокислотной — 98,4 %. Изоляты из Миссисипи имели менее 2,3 % нуклеотидных и 5,2 % аминокислотных различий с вакцинным штаммом Ark DPJ и менее 30 % нуклеотидных и 5,2 аминокислотных различий с изолятом варианта Джорджия Ark. Предполагается, что 26 изолятов ВИБ, генетически близкородственных вакцинному штамму, произошли в результате появления точечных мутаций в геноме этого штамма. Результаты также показали, что тип Ark ВИБ, циркулирующий в течение года в штате Миссисипи, генетически мало изменился или не изменился совсем. Выявление 21-го идентичного изолята ВИБ на различных птицефермах и комплексах явилось следствием особого контроля за распространением инфекционного бронхита среди бройлеров. Все 25 выделенных изолятов вируса ИБП (ВИБП) оказались близкородственными, но отнесены к изученным группам (на основании перекрестной реакции нейтрализации и полного анализа нуклеотидной последовательности S-1-гена. Они были отнесены к серотипу ДЕО 72. Сформирована отдельная группа вирусов ИБП, названная ее новым серотипом Джорджия-98.

Предполагается, что возбудителем SARS (тяжелый острый респираторный синдром — атипичная пневмония) является новый вид коронавирусов. Анализ гомологии последовательностей главных структурных белков вируса, включая S, М и N из 17 штаммов SARS-вируса, опубликованных Генбанком, и 11 штаммов других коронавирусов показал, что корреляция почти отсутствует между каждым штаммом SARS и другими штаммами коронавирусов, в особенности, изолированными в Китае. Результаты могут иметь большое значение для научных исследований по эпидемиологии и источнику патогена SARS и клинической практики КНР.

Генетическая группировка изолятов ВИБ, основанная на гипервариабельной области HVR1 (области 168—197), совпадает с группировкой, основанной на целом гене S1. Тайваньские изоляты ВИБ не удалось поместить в существующие группы. Тест нейтрализации использован для сравнения 9 тайваньских изолятов ВИБ из разных генотипов со стандартными штаммами Massachusetts (HI20) и Connecticut. Показано, что: 3 тайваньских изолята отличаются по серотипу от стандартных штаммов; они относятся к двум серотипам, коррелирующим с их генотипами. Тайваньские изоляты разбиты на группы с высокой, промежуточной и низкой патогенностью. Не установлено корреляции между патотипом и генотипом. С помощью специфических праймеров клонировали ген нуклеокапсида (N) нефропатогенного штамма X ВИБ. Сравнение последовательности N-гена штамма X с таковой 10 других штаммов ВИБ выявило наличие в N-гене штамма X 136 рассеянных сайтнаправленных мутаций. Гомология между штаммом X и некоторыми другими штаммами ВИБ варьировала от 86,26 до 99,67 %. Наибольшая гомология была выявлена между Х — и N-штаммами, принадлежащими к нефропатогенному типа ВИБ. Полученные результаты указывают на относительную консервативность N-гена ВИБ.

К ВИБ в естественных условиях восприимчивы куры всех возрастных групп, наиболее восприимчивы до 30-дневного возраста. Человек восприимчив к ИБ и перебо-левает с легкими признаками поражения верхних дыхательных путей.

Развитие инфекционного процесса сопровождается виремией с локализацией вирусного АГ в лейкоцитах и эритроцитах в течение 16-дневного после заражения. Вирулентные штаммы вируса инфицируют и разрушают реснитчатые эпителиальные клетки, выстилающие трахею. Вирус локализуется в субэпителиальных клетках и обнаруживается в них в течение 21 дня, и в селезенке — до 49 дней. Авирулентный вирус локализуется там же, но инфицирует только часть эпителиальных клеток. У птиц, зараженных контактно, вирус обнаруживают в глотке и трахее через 7, 14, 21 и 27 дней, а в почках — через 35 дней. У цыплят, зараженных интратрахеально, вирус в трахеаль-ной слизи выявляли в течение 5 недель после заражения. Показана возможность ви-русоносительства переболевшей птицы. Наличие инфекции в одном и том же хозяйстве в течение ряда лет свидетельствует о том, что выздоровевшие птицы остаются носителями вируса. Инокулировали 17-дневные куриные эмбрионы 8 различными штаммами вируса ИБ, которые представляют различные серотипы. На 2- и 5-й дни после заражения собирали ткани для гибридизации in situ с антисмысловым рибозон-дом к МРНК, Кодирующей белок мембраны. Во всех случаях на 2-й день выявили интенсивное окрашивание в цитоплазме, в эпителиальных клетках трахеи, легких, бурсы и кишечника. На 5-й день окрашивание было слабым или отсутствовало. Однако в клетках почек выявлялось многоочаговое окрашивание со штаммами Вольге-мут, Грэй, JMK и Масс41. Селезенка не содержала вирусную РНК.

Персистенция ВИБ, ее сроки зависят от штамма. Так, шт. Kagoshima-34 размножался и персистировал, в основном, в почках, а шт. Tottori-2 дольше персистировал в легких.

Экспериментальная инфекция. Ее можно вызвать при интратрахеальном, интрана-зальном, подкожном, внутримышечном, интраперитонеальном и клоачном заражениях цыплят. Однако интратрахеальный метод заражения более надежный. Инкубационный период продолжается 18—36 ч, но может затянуться до 6 дней и более, если инфицируют цыплят, содержащих материнские AT. Длительность инкубационного периода зависит также от дозы и пути введения вируса. При аэрозольном методе заражения симптомы болезни у цыплят проявляются уже через 18—24 ч.

После инфицирования респираторного тракта ВИБ локализуется и размножается в эпителиальных клетках яйцевода и остается там в течение 6—24 дней после инфекции. Инфицированный яйцевод становится инфантильным или кистозным. Вирус персистирует в организме кур не менее 30—45 дней. Из клоаки его выделяют чаще, чем из трахеи.

Кроме цыплят, можно заразить обезьян макака-резус и пещерных летучих мышей. Индейки невосприимчивы, однако при интравенозном введении вируса возникает виремия в течение 48 ч. Мышата-сосуны восприимчивы к шт. Боддет при интрацере-бральном заражении. Штаммы, прошедшие небольшое число пассажей на КЭ, для мышей непатогенны. Получен вирулентный вирус ИБК (ВИБК). После 10 пассажей на однодневных SPF-цыплятах штамма Д971 получен вирулентный штамм D97L)io. Вирулентность его на однодневных цыплятах составляла выше 106-45 ЭЛД5о/о,2 мл или 1015ЛД50/мл. У зараженных цыплят проявлялись типичные клинические признаки ИБК.

Культивирование. Удается в КЭ при заражении в аллантоисную полость, амнион или на ХАО. Адаптация ВИБ к КЭ происходит параллельно с возрастанием процента и сокращением срока гибели их. Заражают обычно 9—10-дневные КЭ. Адаптация вируса наступает через 3—6 и более пассажей. Зараженные КЭ погибают через 3—6 дней в 1-м пассаже до 10 %, в 5-м — до 61 ив 9-м — до 83 % И более. Однако гибель КЭ — не единственный признак заражения ВИБ. Характерно замедление их роста через 6—7 дней после заражения и увеличение количества экстраэмбриональной жидкости. Инфицированные КЭ шарообразной формы, мумифицированы, мельче, чем здоровые. Такой «эффект карликовости» — патогномоничный признак для ВИБ, имеет диагностическое значение при выделении полевых изолятов на КЭ. Кроме того, у инфицированных КЭ желток обычно сморщен, постоянно поражены почки и повышено содержание уратов. ХАО и амниотическая оболочки отечны, объем аллантоисной жидкости увеличен. При введении вируса в аллантоисную полость наивысшая концентрация его обнаруживается через 36 ч после заражения в ХАО, затем в аллантоисной жидкости, амнионе и печени эмбриона. Если погибшие эмбрионы остаются на некоторое время в инкубаторе, титр вируса снижается.

Максимальный выход вируса 107.2 ИД50/о,1мл выявляется при заражающей дозе 103 ЭИД50/0.1 мл в условиях 36 °С. Более высокие заражающие дозы не увеличивают общего «урожая» вируса. Подбор оптимальной температуры и продолжительности культивирования является важным для повышения «урожая», если иметь в виду, что в аллантоисной жидкости погибших КЭ обнаружено интерферирующее вещество. Различные штаммы ВИБ могут при изменении температуры проявлять различную вирулентность для КЭ и органных культур, что отражает их вирулентность и тропизм.

Большинство штаммов вируса размножается в культуре клеток почки КЭ, фибробластов КЭ и ВНК-21. В клетках Mela никакие штаммы ВИБ не размножались. Органные культуры яйцеводов оказались высокочувствительными к инфицированию вакцинным шт. Н52. Однако, прежде чем вирус приобретает способность размножаться в первичной культуре клеток и органных культурах трахеи кур, его нужно адаптировать к КЭ. Вирус, адаптированный к мозгу мышей-сосунов, может обусловить прямую реакцию ГА и реплицироваться в клетках Vero. Титры вируса в этой культуре достигают 4,6—5,0104 БОЕ/мл. Культура клеток легкого и почек КЭ в 40—60 раз чувствительнее культуры клеток печени. Вирус также можно культивировать в органной культуре трахеи КЭ. ЦПД его в культуре клеток почки КЭ проявляется образованием синцития с последующим некрозом. Синцитий появляется через 6 ч, а через 18—24 ч он увеличивается, включая 100 и более ядер.

Все штаммы ВИБ в присутствии трипсина в среде покрытия 20—40 мкг/мл на 3—4-й день инкубации образуют бляшки до 6 мм в диаметре. Титр вируса в присутствии трипсина для разных штаммов достигает 3,ЗТ05 БОЕ/мл. Все изученные 17 австралийских штаммов ВИБ образовывали бляшки на 2-м пассаже в культуре клеток почки КЭ, которые различались по срокам их появления, размерам (от 2 до 5 мм) и внешнему виду. Хотя метод культивирования на КЭ в 18—84 раза более чувствителен метода бляшек, однако титрование методом бляшек оказалось более точным. Половые гормоны (эстраген, тестостерон, кортизон) повышают продукцию вируса в органных культурах трахеи. Из многих штаммов шт. Beaudette индуцирует бляшки в культуре клеток ВНК-21, на этих клетках из этого штамма, после обработки его мутагеном, был изолирован ts-мутант. Чувствительность перевиваемой линии клеток эмбрионов кур к ВИБ охарактеризована после 5 серийных пассажей. Репликация вируса определялась по цитопатическому эффекту с помощью ЭМ, НМФА и ОТ-ПЦР. Через 96 ч после инфекции ЦЭ составлял 75 %, клетки округлились, «сползали» в ЭМ, был виден коронавирус. Цитоплазматическая флуоресценция появлялась уже через 24 ч после инфекции, прогрессировала и все время соответствовала уровню вирусной РНК ВИБ инфицированных клеток, которая была выявлена в RT-PCR. Уровень внеклеточного вируса был измерен титрованием на клетках почки цыпленка и в куриных эмбрионах. В культуре клеток и КЭ относительные титры через 24—120 ч после инфекции колебались от 4,0 до 6,0 lg EIDso/cm3 на куриный эмбрион и от 2 до 6,0 lg TCIDso/cm3-Линия клеток CER оказалась пригодной для изучения вируса М41.

Особенности репродукции. Дефектная РНК (дРНК) CD-61 штамма Beaudette ВИБ Реплицируется и упаковывается при использовании 4 гетерологичных штаммов ВИБ (М41, Н20, HV10 и D207) в качестве вирусов-помощников. Секвенирование геномных РНК этих штаммов ВИБ показало, что уровень нуклеотидных различий составляет до 17 % в лидерной последовательности (ЛП) идо 4,3 % во всей смежной 5′-не-транслирующей области (5′-НТО). Анализ 5′-концов спасенных дРНК обнаружил, чтоЛП штамма Beaudette, присутствовавшая в CD-61, заменилась на ЛП штамма-помощника, но 5′-НТО соответствует исходной последовательности CD-61. Эти данные показали, что феномен переключения ЛП, описанный ранее для вируса гепатита мышей и бычьего коронавируса, наблюдается и во время репарации дРНК ВИБ. В 5′-НТО ВИБ имеются 3 предсказанные шпилечные структуры, первая из которых проявляет высокую степень ковариации среди штаммов ВИБ, что является филогенетическим доказательством существования этой структуры и ее возможного участия в репликации ВИБ. Первым событием процессинга полипротеина ВИБ является протеолиз пептидной связи глиб73-глиб74 под действием первого домена папаино-подобной протеазы PLPD-1 с освобождением зрелого белка 87 кД. Продукт, кодируемый областью нуклеотидов 2548—8865 ВИБ, расщепляется по дипептидной связи ГЛИ2265-ГЛ И2266 с образованием N-концевого белка 195 кД и С-концевого белка 41 кД. С использованием антисыворотки, полученной к последовательности ВИБ, кодируемой нуклеотидами 8865—9786, белок 33 кД, представляющий ЗС-подобную протеи-назу специфически иммунопреципитируется из зараженных клеток.

Большинство штаммов ВИБ не агглютинируют эритроциты птиц, однако при обработке вируса фосфолипазой С типа 1 он легко вызывает ГА. Энзим модифицирует оболочку вируса за счет разрушения фосфолипидов и вызывает появление на поверхности вириона ГА. Кроме того, ГА-свойства обоих типов ВИБ проявляются после обработки их 0,5 % раствором трипсина (90 мин при 37 °С), который разрушает пептидные связи аргинина и лизина поверхностных молекул вирусного белка и освобождает скрытые молекулы ГА. У глубокоадаптированных к КЭ штаммов (подобных шт. Beaudette), имеющих высокий инфекционный титр после обработки трипсином, фосфолипазой С, нейраминидазой ГА активность не проявляется. Феномен объясняется изменением физической и химической структуры вирусного белка, связанной с потерей патогенности и иммуногенности вируса для птицы. В настоящее время уточнено, что шт. Коннектикут (Konnekticut) способен агглютинировать эритроциты кур, в то время как шт. Массачусетс (Massachusets) подобную активность проявляет только после обработки трипсином или фосфолипазой С. Отработан метод изготовления ГА антигена из изолятов ВИБ. Лиофилизированный ГА сохранял активность при -20 °С в течение 8 недель, при 4 °С в эти же сроки терял до 50 % ее. Титр ГА вируса повышается до 1:256 — 1:512 при его пассажах в трахее кур или клеточной культуре трахеи кур.

Гемадсорбирующие свойства не установлены.

Штаммы ВИБ различаются по интерферониндуцирующей способности. Так, из 10 штаммовтолько 3 (шт. IB-41, Нерима и Ишида) не индуцировали синтез интерферона в КЭ, тогда как остальные вызывали образование его до 190 ед.

Источники и пути передачи инфекции. Основным источником инфекции служат больные и переболевшие цыплята и куры, которые выделяют вирус во внешнюю среду или остаются вирусоносителями до 49-105 дней после переболевания. Выделение вируса из организма больной птицы происходит со слюной, истечениями из носа и глаз, с фекалиями. Птица заражается, в основном, аэрогенным путем, а также при приеме инфицированного корма и воды. Распространение инфекции возможно также через инфицированную внешнюю среду: помещения, кормушки, подстилку, одежду и обувь обслуживающего персонала. Кроме того, человек может быть и активным переносчиком вируса в период переболевания птицы ИБ. У петухов вирус выделяется со спермой в течение 20 дней после заражения, поэтому возможно заражение половым путем. Кроме того, вирус передается трансовариально при остром, хроническом и бессимптомном течениях болезни. Доказана возможность выделения его из яиц, полученных от кур через 1, 2, 4 и 6 недель после их заражения. Выделен вирус из яиц, полученных от кур в ранний период снижения яйценоскости, а у 30 % цыплят, выведенных из таких яиц, отмечали отечность. От этих цыплят удавалось выделить возбудителя ИБ. Вирус изолирован из желтка и белка яиц с глубоким поражением скорлупы, которые были получены от кур из хозяйства, неблагополучного по данной болезни. Таким образом, поколеблено прежнее представление об ИБ, как о заболевании только с горизонтальным путем передачи инфекции. Штамм птичьего вируса инфекционного бронхита был изолирован от курицы из группы птиц с симптомом снижения яйценоскости. Изолированный вирус в куриных эмбрионах интерферировал с ВНБ, приводил к снижению роста куриного эмбриона и вызывал агглютинацию эритроцитов цыпленка после обработки трипсином.

Иммунитет и специфическая профилактика. Переболевшая птица резистентна к заражению гомологичным штаммом вируса в течение 5—6 месяцев. Трудность в проблеме специфической профилактики обусловлена большой естественной АГ и иммунологической вариабельностью полевых штаммов вируса. К вирусу ИБ высокорезистентны цыплята линии С и высокочувствительны линии 151. Для профилактики инфекции применяют живые и инактивировакные вакцины. Отработана технологическая схема изготовления как моновалентных инактивированных форм вакцин против ИБ, БН, ИББ, синдрома снижения яйценоскости. Испытания поливалентной вакцины показали наличие высокого уровня AT к вирусам ИБ, БН, ИББ, ССЯ76 после вакцинации инактивированными вакцинами. Специфическая профилактика болезни включает применение живых и инактивированных вакцин: первые — в стадах бройлеров и ремонтного молодняка мясных и яичных кур (первичная обработка), вторые — в стадах кур-молодок в возрасте 14—18 недель. Во ВНИИЗЖ налажено производство живой вакцины из штамма Н-120. Для создания длительного и напряженного иммунитета против инфекционного бронхита кур (ИБК) в стадах яичной и мясной птицы проводят комплексную обработку 2—3 раза живой вакциной в возрасте 1 — 14 недель, а затем инактивированной — в 14—18 недель. При вакцинации против ИБК, Вызванного вариантными штаммами вируса, рекомендуют использовать инактивиро-ванную вакцину. В указанном институте разработана технология инактивированной моновалентной вакцины против ИБК и ассоциированной против ИБК, Болезни Ньюкасла и синдрома снижения яйценоскости.

Применение инактивированных вакцин. Достаточно эффективными оказались эмульгированные вакцины из концентрированного вируса. Введение инактивированной вакцины в 3- и 16-недельном возрасте дало такой же эффект, как и прививка живыми вакцинами: первый раз вакциной Н-120 (120 в КЭ) и вакциной из шт. Н52 (52-й пассаж вируса в КЭ). Наиболее выраженный иммунный ответу 100 % цыплят получен при вакцинации в 3-недельном возрасте живой вакциной из шт. Н120, а в 16-недельном возрасте — инактивированной эмульсинвакциной. Рекомендовано при конструировании инактивированных вакцин против ИБ использовать несколько штаммов (создавать поливалентную вакцину). Приготовленная в Китае вакцина против ИБК из штамма D и инокулированная цыплятам через 10—14 дней индуцировала антитела к ВИБК, которые обнаруживались через 21 день у 85 % птиц; вторая инокуляция, проведенная через месяц, защищала к 6 месяцу 87—100 %.

Применение живых вакцин. Штаммы, полностью утратившие вирулентность, практически неиммуногенны. Поэтому живые вакцины готовят из аттенуированных штаммов, обладающих различной степенью остаточной вирулентности. Для первой прививки применяют более аттенуированные и менее иммуногенные штаммы, для второй — более вирулентные. Живые вакцины применяют орально ( с питьевой водой) или путем закапывания в нос. Введение живой вакцины в зоб цыплятам создавало устойчивость к заражению без образования циркулирующих AT. Эти данные свидетельствуют О Важной роли местного иммунитета при ИБ. Материнские AT от иммунных кур-несушек передаются через яйцо цыплятам, которых они защищают в первые 2—4 недели жизни от ИБ. Период полужизни материнских AT составляет немногим более 5 дней. Со второй недели жизни титр их начинает снижаться. Оптимальный возраст для вакцинации цыплят живыми вакцинами составляет 2—3 недели. Учитывая корреляцию титра ВНА в сыворотках крови кур-несушек и в желтке яиц, предложено использовать последние для оценки иммунитета в РН. Яйца, снесенные в течение 60 дней, после повторной вакцинации содержат высокий уровень (концентрацию) AT.

Последовательная вакцинация живыми вакцинами разных типов обеспечивает накопление в сыворотке крови птиц широкого спектра AT, которые превосходили даже типы, примененные для вакцинации. Полученный от иммунизации против ИБ молодняк за счет материнских AT IgG-класса устойчив к заражению патогенным вирусом. Вирусспецифический IgG обнаружен и в желтке яиц больных И Б кур в течение 60 дней. Определяли эффективность живых аттенуированных вакцин Ма5 и 4/91 против нефропатогенной линии ВИБ (ИВ, В1,648). По каждому параметру одна вакцина Ма5 обладала плохими защитными свойствами. Вакцина 4/91 одна или в комбинации хорошо защищала почки цыплят-бройлеров.

Сотрудниками ВНИВИП создана живая вакцина из аттенуированного штамма ВИБ. В неблагополучных пунктах иммунизируют всех цыплят в 10—15-дневном возрасте двукратно через 14—15 дней. Ревакцинируют птиц в 100—120-дневном возрасте. Вакцину вводят интраназально или с питьевой водой. В последние годы в России применяют вакцины против ИБ производства различных зарубежных фирм.

Температурочувствительный мутант ВИБ (тип Арканзас) получен путем серийного пассирования при пониженной температуре (35—28 °С). Вирус, в основном, размножался в верхних дыхательных путях и очень слабо в других органах. Он оказался авирулентным для 3—7-дневных цыплят-бройлеров. Доза вакцины, обеспечивающая 100 % защиту привитой птицы, составляла 103— 105 ЭИД50- Вакцинация 2-недельных цыплят аэрозольно или закапыванием в глаз вакцины из шт. Н120 создавала устойчивость примерно к 31-му дню.

При оценке различных программ вакцинации против ИБ в компании Питман Моор сравнивали титры AT в реакциях задержки гемагглютинации и нейтрализации. Цыплят первый раз иммунизировали в возрасте различными живыми вакцинами, а повторно — в 16-недельном возрасте инактивированными адьювант вакцинами из шт. М41 или GV101. В итоге установлено, что уровень AT у привитых цыплят был выше к вирусу М41, чем к вирусу серотипа Д207. У птиц, иммунизированных вакциной из шт. М41 и ревакцинированных убитой вакциной из двух штаммов, имелись более высокие титры AT к серотипам Массачусетс и Д207. Аттенуированные вакцинные шт. Массачусетс 33 и HI20 персистируют в трахее и легких с 3 до 13 дней после вакцинации.

Эффективность живых аттенуированных вакцин Ма5 и 4/91 против нефропатогенной линии вируса инфекционного бронхита (ВИБ) изучали по макро — и микроизменениям в почках, используя ПЦР для определения РНК ВИБ в ткани почек. По каждому параметру одна вакцина Ма5 обладала плохим защитным свойством. Вакцина 4/91 одна или в комбинации хорошо защищала почки цыплят бройлеров. Сообщается о конструировании рекомбинантного бакуловируса, экспрессирующего гликопротеин S1 изолята SD/97/01 вируса инфекционного бронхита. Методом обратной транскрипции-ПЦР амплифицированакДН К длиной 1,5 т. п. н., содержащая ген нуклеокапсидного белка N китайского изолята ВИБ и клонирована на векторе pUCl 19. Полученная плазмида охарактеризована методами рестрикционного анализа, дот-гибридизации и Саузерн-блот-гибридизации.

Связь титров антител с резистентностью. Нет прямой зависимости напряженности иммунитета от уровня ВНА. В резистентности птицы важную роль играет местный тканевой иммунитет респираторного тракта. Цыплята, вакцинированные аэро-зольно живым вирусом, резистентны, даже если в сыворотке крови нет специфических AT. Установлена прямая зависимость между устойчивостью птицы к заражению вирулентным вирусом и наличием обширных гистопатологических изменений в гарднеровых железах после вакцинации.

Оценку степени иммунитета у вакцинированных цыплят можно проводить по активности реснитчатого эпителия трахеальных эксплантатов, полученных после трахеального контрольного заражения. Интраназальная или интраокулярная иммунизация суточных цыплят с наличием материнского иммунитета вакцинным шт. Н120 обеспечивает устойчивость против интратрахеального заражения патогенным ВИБ. Эффективность вакцинации против ИБ вакцинами из шт. Массачусетс и Арканзас оценивается на основании выделения ВИБ из трахеальных тампонов после недельного периода заражения в полевых условиях.

Установлена иммунологическая совместимость вирус-вакцины из шт. Н120 ВИБ и вирус-вакцины из шт. Бор74 ВГНКИ вируса НБ при ассоциированном применении аэрозольным способом. Продолжительность иммунитета против ИБ и НБ составляла 120 дней.

Попытка разработать способ вакцинации против ИБ in ovo не дала явно положительных результатов. Вакцины Iboral 1 или Bioral H120 приводили к развитию лишь незначительных поствакцинальных реакций со стороны респираторной системы у вылупившихся цыплят. На 15-й день после вакцинации (12-й день после вылупле-ния) в сыворотках цыплят определялись повышенные титры AT в РЗГА по сравнению с контролем. Вакцина iboral 1 приводила к некоторым нарушениям диаграммы вы-лупления.

Серологическая оценка поствакциншьного иммунитета. Эффективность вакцины оценивается по разным критериям, из которых основным являются клинический ответ, носительство и диссиминация вируса, реакция трахеального эпителия in vivo и in vitro, защита от вирулентного гомологичного и гетерологичного типов ВИБ, образование секреторных и гуморальных AT Для оценки профилактической эффективности вакцинации цыплят против И Б предложен клиренс-тест.

Высокий уровень AT достигается к концу 3-й недели и регистрируется в течение года. На прививку инактивированной вакциной ВНА в сыворотках крови цыплят и кур появляются с 7—14-го дня в титрах 5—7 log2, нарастают к 30—60-му дню до 8—10,5 log2 и сохраняются на таком уровне до 6 месяцев.

В желтке яиц, полученных от кур-реконвалесцентов, имеются AT, которые затем передаются цыплятам. Уровень их у цыплят сразу же после вылуплен ия высокий, затем в течение 4 недель постепенно снижается. Пассивные AT не предотвращают респираторную инфекцию у цыплят, но несколько ослабляют течение болезни. Материнские AT обеспечивали устойчивость цыплят к заражению в течение 3 недель.

Для определения напряженности иммунитета у вакцинированной птицы после ее заражения вирулентным вирусом предложен метод выявления вирусного АГ с помощью флюоресцирующих AT Кроме того, предложена оценка поствакцинального иммунитета на основе активности ресничек в кольцах трахеи. При изучении гуморального иммунитета установлена тесная корреляция между активностью реснитчатого эпителия и выделением вируса из тканей, что послужило основанием рекомендовать первый тест в качестве критерия оценки местного иммунитета при определении перекрестного иммунитета. Однако корреляция между уровнем AT и численностью подверженных к заражению ВИБ птиц незначительна. Резистентность связана с клеточным опосредованным иммунитетом, что подтверждено методом бласттрансформации лимфоцитов и реакцией гиперчувствительности замедленного типа.

Оценка иммунитета у птиц, привитых инактивированными вакцинами, основана на обнаружении ВНА и ПА. Обычно через 2 недели после второй вакцинации индекс нейтрализации составляет 3 lg. С помощью ИФА можно достоверно оценить как поствакцинальный, так и постинфекционный статус у экспериментально зараженных птиц. Метод не является специфическим для серотипирования ВИБ, но высокочувствителен для выявления AT в сыворотке крови. Данные, полученные методом ИФА при оценке иммунного статуса, хорошо совпадают с результатами, полученными в других серологических реакциях: РН, РЗГА, вирусовыделения и реакции ткани трахеи.

Установлена тесная корреляция между активностью мерцательного эпителия и гистологическими изменениями, вызванными вирусом, и незначительная — между титрами AT (в РН и РИГА) и напряженностью иммунитета. Однако не установлено корреляции между показателями клеточного и гуморального иммунитета у цыплят, иммунизированных инактивированной эмульсинвакциной. Установлена корреляция титров ВНА в сыворотках крови и желтках яиц и вакцинированных кур.

{SOURCE_HOST}

ОРЗ
насморк и сыпь на лице у ребенка

Actionteaser.ru — тизерная реклама Во время ветрянки высыпания могут быть более выражены на лице, туловище и на волосяном покрытии кожи головы. Протекает ветрянка таким образом, что в начале появляются небольшие плоские красные пятна, которые буквально за несколько часов становятся водянистыми, начинают зудеть и появляется высокая температура. Важно следить за новыми …

ОРЗ
Сдают кровь при орз

Содержание Прием лекарственных препаратовПростуда и анализы на ВИЧКакие анализы крови можно сдавать при заболеванииКак отличить грипп от орви и ОРЗ, и почему медики не спешат диагностировать вирус гриппа у обратившихся больныхКак отличить грипп от орви и ОРЗ по симптомамКак отличить грипп от орви и ОРЗ по анализу кровиКак отличить свиной …

ОРЗ
Лучшее средство профилактики орви

Содержание Рекомендуемые группы медикаментовСписок препаратовПрепарат «Амизон»Препарат «Арбидол»Лекарство «Ремантадин»Препарат «Анаферон»Средство «Амиксин»Лечение и профилактика детейПрепараты «Виферон»: свечи и мазьЛекарство детский «Анаферон»Мазь «Оксолиновая»Препарат «Афлубин»Препарат «Интерферон»Средство «Гриппферон»Препарат «Арбидол»Как уберечься от недуга беременным?ЗаключениеПрофилактика ОРВИ у новорожденных и грудничковПрофилактика и лечение ОРВИ и гриппа в детском садуПрепараты для профилактики ОРВИ у детейСпособы профилактики гриппа и ОРВИ: …